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CCK8/細(xì)胞增殖檢測

簡要描述：CCK8/細(xì)胞增殖檢測在37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育一定時間(依不同的細(xì)胞種類而定，一般是1 - 4 h)。酶標(biāo)儀 測定450 nm處的吸光值，以細(xì)胞數(shù)為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可測定未知樣品的細(xì)胞數(shù)量。使用此 標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是試驗條件與此一致。

  • 更新時間：2025-02-17
  • 訪  問  量：505
  • 價格：面議
  • 廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

詳細(xì)介紹

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    • CCK8/細(xì)胞增殖檢測

    1. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

    收集培養(yǎng)可傳代的細(xì)胞，確定細(xì)胞密度，然后接種細(xì)胞；
    按比例(如1:2的比例)依次用培養(yǎng)基等比梯度稀釋細(xì)胞，一般做5 - 7個細(xì)胞數(shù)梯度，每組3 - 6個重復(fù)，接種至96孔板中，每孔加入100 ul 的細(xì)胞懸液；
    每孔加入10 ul CCK-8 Solution，輕輕混勻，在37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育一定時間(依不同的細(xì)胞種類而定，一般是1 - 4 h)。酶標(biāo)儀 測定450 nm處的吸光值，以細(xì)胞數(shù)為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可測定未知樣品的細(xì)胞數(shù)量。使用此 標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是試驗條件與此一致。

    1. 細(xì)胞活性檢測

    接種細(xì)胞于96孔板中(100 ul/孔，避免氣泡產(chǎn)生)預(yù)培養(yǎng)24 h，同時設(shè)置空白組和對照組；
    向每孔加入10 ul CCK-8 Solution(建議沿細(xì)胞板壁加入，輕晃，避免氣泡產(chǎn)生)；
    在細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育一定時間；
    酶標(biāo)儀測定450 nm處的吸光值。

    1. 細(xì)胞增殖—毒性檢測

    接種細(xì)胞于96孔板中(100 ul/孔，避免氣泡產(chǎn)生)預(yù)培養(yǎng)24 h，同時設(shè)置空白組和對照組；
    每孔分別加入不同濃度的待測藥物，在培養(yǎng)箱中孵育一段時間(依據(jù)待測藥物而定)；
    向每孔加入10 ul CCK-8 Solution(建議沿細(xì)胞板壁加入，輕晃，避免氣泡產(chǎn)生)，培養(yǎng)箱中孵育一定時間；
    酶標(biāo)儀測定450 nm處的吸光值。

    1. 換算公式

    細(xì)胞存活百分比=[(A-C)/(B-C)] x100
     抑制百分比=[(B-A)/(B-C)] x 100
    A:實驗組吸光值(為含有培養(yǎng)基、細(xì)胞、待測藥物和CCK-8 Solution的吸光值)
    B:對照組吸光值(為含有培養(yǎng)基、細(xì)胞、CCK-8 Solution的吸光值)
    C:空白組吸光值(為含有培養(yǎng)基、CCK-8 Solution的吸光值)客戶提供

    • 客戶提供

    需要檢測的細(xì)胞、需要檢測的藥物

    • CCK8/細(xì)胞增殖檢測實驗結(jié)果提供

    1. 原始數(shù)據(jù)、作圖曲線、實驗報告。


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